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细胞培养监测

科学家通常使用标准显微镜检查细胞培养物的性能,细胞生长和培养物污染。 这种方法的确为细胞培养的质量提供了一定程度的可信度。 但是,这足以产生可重现,可靠和相关的数据吗? 根据《良好细胞培养规范》(GCCP)的指导方针,维持细胞培养的高标准还有很多其他方面,以确保所产生结果的可重复性,可信性,可接受性和正确应用1.

参考文献:

1) Gerhard Gstraunthaler (2010) Altex 27, Special Issue; 141-146

细胞培养监测的不同方面

良好的细胞培养规范要求细胞培养实验的报告包括对培养细胞的基本和详细描述,描述培养起始的起源和方式,细胞培养的来源和形态及其分化状态。 形态,基因表达,生长速率,生存力和对基质的粘附都可以用来描述细胞系的表型和分化阶段。 使用延时显微镜以及自动生长曲线记录可以帮助记录细胞培养物的形态以及生长和运动行为。 最后,应使用核型分析,DNA分析,指纹图谱或交叉污染测试来鉴定和鉴定细胞系。

众所周知,培养基的组成,培养皿和培养基质的性质以及继代培养程序对细胞培养有重要影响,应尽可能进行标准化。 定义细胞培养的标准操作程序(SOP)有助于减少影响细胞培养性能和测定结果的变量。 应精确定义亚培养的细节,例如分裂时的培养融合度,接种密度和传代总数。

但是,即使是标准的细胞培养,其生物系统也会发生变化。 例如,诸如患者来源的材料之类的原代细胞系统的增殖行为可能有很大的不同。 此外,细胞培养的性能高度依赖于用户,需要一定程度的专业知识才能实现细胞培养的一致性。 无论这些挑战如何,标准化的细胞培养都非常重要,因为细胞培养的条件可能会对使用培养的细胞获得的下游实验结果产生重大影响。

显微镜足够小,可以放入细胞培养箱中,同时提供活细胞成像和延时记录功能,可以帮助监控细胞培养。 一些显微镜提供的自动细胞融合度测定可以减少操作员在细胞培养操作中的依赖性变化。 不幸的是,大多数显微镜不适合在培养箱内操作,或者它们太大而无法使用,或者太有价值而无法被细胞培养监控应用所阻挡。

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